1.Què és el cultiu cel·lular?
El cultiu cel·lular es refereix a l'eliminació de cèl·lules d'animals o plantes i després fer-les créixer en un entorn artificial favorable.Les cèl·lules es poden prendre directament del teixit i descompondre's per mitjans enzimàtics o mecànics abans del cultiu, o bé es poden derivar de línies cel·lulars o línies cel·lulars establertes.
2. Què és la cultura primària?
El cultiu primari fa referència a l'etapa de cultiu després que les cèl·lules es separen del teixit i proliferen en condicions adequades fins que ocupen tots els substrats disponibles (és a dir, arriben a la confluència).En aquesta etapa, les cèl·lules s'han de subcultivar transferint-les a un nou recipient amb un medi de creixement fresc per oferir més espai per al creixement continuat.
2.1 Línia cel·lular
Després del primer subcultiu, el cultiu primari s'anomena línia cel·lular o subclon.Les línies cel·lulars derivades de cultius primaris tenen una vida útil limitada (és a dir, són limitades; vegeu més avall), i a mesura que passen, dominen les cèl·lules amb la capacitat de creixement més alta, donant lloc a un cert grau de genotip a la població consistent amb el fenotip.
2.2 Soca cel·lular
Si una subpoblació d'una línia cel·lular es selecciona positivament del cultiu mitjançant la clonació o algun altre mètode, la línia cel·lular es convertiria en una soca cel·lular.Les soques cel·lulars solen adquirir canvis genètics addicionals després de l'inici de la línia parental.
3. Línies cel·lulars limitades i contínues
Les cèl·lules normals solen dividir-se només un nombre limitat de vegades abans de perdre la capacitat de proliferar.Aquest és un esdeveniment determinat genèticament anomenat senescència;aquestes línies cel·lulars s'anomenen línies cel·lulars finites.No obstant això, algunes línies cel·lulars esdevenen immortals mitjançant un procés anomenat transformació, que pot ocórrer de manera espontània o pot ser induïda per productes químics o virus.Quan una línia cel·lular finita es transforma i adquireix la capacitat de dividir-se indefinidament, es converteix en una línia cel·lular contínua.
4.Condició cultural
Les condicions de cultiu de cada tipus de cèl·lula són molt diferents, però l'entorn artificial per al cultiu de cèl·lules sempre es compon d'un recipient adequat, que conté el següent:
4.1 Substrat o medi de cultiu que aporta nutrients essencials (aminoàcids, hidrats de carboni, vitamines, minerals)
4.2 Factors de creixement
4.3 Hormones
4.4 Gasos (O2, CO2)
4.5 Entorn físic i químic regulat (pH, pressió osmòtica, temperatura)
La majoria de cèl·lules depenen de l'ancoratge i s'han de cultivar sobre un substrat sòlid o semisòlid (cultiu adherent o monocapa), mentre que altres cèl·lules poden créixer flotant al medi (cultiu en suspensió).
5.Criopreservació
Si hi ha excés de cèl·lules al subcultiu, s'han de tractar amb un agent protector adequat (com DMSO o glicerol) i emmagatzemar-les a una temperatura inferior a -130 °C (criopreservació) fins que siguin necessàries.Per a més informació sobre el subcultiu i la criopreservació de cèl·lules.
6.Morfologia de les cèl·lules en cultiu
Les cèl·lules en cultiu es poden dividir en tres categories bàsiques en funció de la seva forma i aspecte (és a dir, morfologia).
6.1 Les cèl·lules dels fibroblasts són bipolars o multipolars, tenen una forma allargada i creixen enganxades al substrat.
6.2 Les cèl·lules epitelials són poligonals, tenen una mida més regular i estan unides a la matriu en làmines discretes.
6.3 Les cèl·lules semblants als limfoblasts són esfèriques i solen créixer en suspensió sense unir-se a la superfície.
7.Aplicació del cultiu cel·lular
El cultiu cel·lular és una de les principals eines utilitzades en biologia cel·lular i molecular.Proporciona un excel·lent sistema model per estudiar la fisiologia normal i la bioquímica de les cèl·lules (com ara la investigació metabòlica, l'envelliment), els efectes de fàrmacs i compostos tòxics sobre les cèl·lules, i la mutagènesi i els efectes cancerígens.També s'utilitza per al cribratge i desenvolupament de fàrmacs i per a la fabricació a gran escala de compostos biològics (com ara vacunes, proteïnes terapèutiques).El principal avantatge d'utilitzar el cultiu cel·lular per a qualsevol d'aquestes aplicacions és la consistència i la reproductibilitat dels resultats que es poden obtenir mitjançant un lot de cèl·lules clonadas.
Hora de publicació: Jun-03-2019