1.Elecció de la línia cel·lular adequada
Quan trieu la línia cel·lular adequada per al vostre experiment, tingueu en compte els criteris següents:
a.Espècies: les línies cel·lulars no humanes i no primats solen tenir menys restriccions de bioseguretat, però al final el vostre experiment determinarà si s'utilitza un cultiu d'una espècie concreta.
b.Característiques: Quin és l'objectiu del vostre experiment?Per exemple, les línies cel·lulars derivades del fetge i el ronyó poden ser més adequades per a les proves de toxicitat.
c.Limitada o contínua: tot i que escollir entre una línia cel·lular limitada us pot oferir més opcions per expressar la funció correcta, les línies cel·lulars contínues són generalment més fàcils de clonar i mantenir.
d.Normals o transformades: Les línies cel·lulars transformades solen tenir un ritme de creixement més elevat i una major eficiència de sembra, són contínues i requereixen menys sèrum en el medi de cultiu, però el seu fenotip ha sofert canvis permanents per transformació genètica.
e.Condicions i característiques de creixement: Quins són els vostres requisits per a la velocitat de creixement, la densitat de saturació, l'eficiència de clonació i la capacitat de creixement de la suspensió?Per exemple, per expressar proteïnes recombinants amb alts rendiments, és possible que hàgiu de seleccionar línies cel·lulars que tinguin taxes de creixement ràpides i la capacitat de créixer en suspensió.
f.Altres criteris: si utilitzeu una línia cel·lular limitada, hi ha prou estoc disponible?La línia cel·lular està totalment caracteritzada o l'has de comprovar tu mateix?Si utilitzeu una línia cel·lular anormal, hi ha una línia cel·lular normal equivalent que es pugui utilitzar com a control?La línia cel·lular és estable?Si no és així, què tan fàcil és clonar-lo i generar prou estoc congelat per al vostre experiment?
2.Obtenir línies cel·lulars
Podeu crear el vostre propi cultiu a partir de cèl·lules primàries o podeu optar per comprar cultius cel·lulars establerts a proveïdors comercials o sense ànim de lucre (és a dir, bancs de cèl·lules).Els proveïdors de renom ofereixen línies cel·lulars d'alta qualitat que s'han provat acuradament per a la seva integritat i asseguren que el cultiu està lliure de contaminants.Recomanem no agafar en préstec cultius d'altres laboratoris perquè tenen un alt risc de contaminació de cultius cel·lulars.Independentment de la seva font, assegureu-vos que totes les línies cel·lulars noves s'han provat per a la contaminació per micoplasma abans de començar a utilitzar-lo.
Hora de publicació: 01-feb-2023